類別
PREDICELL™套件
轉運
蛋白MATE1
技術
吸收轉運蛋白分析
攝取轉運蛋白分析
轉運蛋白的細胞攝取機制在許多與結構無關的藥物的藥代動力學中起著關鍵作用。這些蛋白質存在于所有重要的藥理屏障組織中，能夠使中低滲透性藥物跨質膜轉運，從而確定吸收，分布和消除途徑。與攝取轉運蛋白相互作用的測試有可能預測藥物在系統(tǒng)水平運動中的主要因素。評估受試物對攝取轉運蛋白的抑制潛力可能表明藥物與藥物之間的相互作用，例如在環(huán)孢菌素A和他汀類藥物1、2的情況下。
如今，聯(lián)合療法已廣泛用于許多不同治療類別的藥物。他汀類藥物通常與其他藥物（例如免疫抑制劑，抗糖尿病藥或貝特類藥物）合用，以在診所治療患者。這增加了在這些藥物顯著的藥物相互作用的風險3，4，5，6。
因此，重要的是通過使用適當的體外工具來指導藥物開發(fā)中的量身定制的臨床相互作用研究，來解決與各個患者群體相關的可能的藥物-藥物相互作用風險。除了建立完善的細胞色素P450相互作用研究以外，藥物相互作用還可能發(fā)生在藥物主動轉運的水平上，涉及OATP和OAT載體和/或不同的ABC轉運蛋白。在涉及他汀類藥物的藥物相互作用中，除細胞色素P450酶外，還發(fā)現(xiàn)OATP溶質載體家族的成員也參與其中。
表達人類OATP載體的重組細胞系通常用于研究這些載體7的體外藥物相互作用的潛能。間接和直接攝取轉運蛋白測定是用表達所選人或大鼠攝取轉運蛋白的穩(wěn)定轉染子進行的。細胞粘附在處理過的表面上，從而可以輕松分離運輸?shù)暮瓦^量的低滲透性底物分子。
在這些測定中，測量了測試物品（TA）對攝取轉運蛋白介導的標記探針底物的轉運的抑制潛力。用冷TA進行測定。探針底物通過選定的人類攝取轉運蛋白轉運到轉染的細胞中。值以相對標度表示，其中100％定義為在溶劑存在下且沒有TA（無抑制）的轉運，0％定義為在沒有轉運蛋白活性下檢測到的轉運。IC 50定義為抑制報道分子底物轉運50％所需的濃度。該測定法提供了有關所選攝取轉運蛋白與所研究的TA之間可能影響探針底物轉運的任何相互作用（底物或抑制劑）的信息。
底物評估通常作為抑制研究的后續(xù)行動，但可以在單獨的模塊中進行。每個模塊都是根據(jù)前一個模塊的結果計劃和啟動的。
第1單元–檢測主動傳輸?shù)脑圏c實驗：
預期的結果是確定是否可以測量攝取轉運蛋白介導的冷（或同位素標記）化合物進入細胞的攝取。
模塊2 –運輸?shù)脑敿殑恿W特性：
模塊2的目的是確定KM和Vmax值。將使用已知的底物和抑制劑（在抑制研究中用作探針底物和參考抑制劑）研究運輸抑制作用。將在優(yōu)化的TA濃度和7種濃度的抑制劑/底物分子下研究已知抑制劑/底物對TA轉運的影響。
模塊3 –潛在的藥物相互作用的特征：
選擇的已知或未知的藥物的IC50取決于測試物品的運輸。了解有關我們的轉運蛋白測定服務的更多信息。SOLVO Biotechnology已開發(fā)并獲得了廣泛的穩(wěn)定轉染的細胞系，用于研究測試物品與攝取轉運蛋白的相互作用。我們的承運人產品組合正在不斷擴大。SOLVO還可以定制開發(fā)其他轉染的細胞系。也可提供攝取轉運蛋白過表達細胞系的許可。
參考文獻：
1. Shitara Y，Itoh T，Sato H，Li AP和Sugiyama Y（2003）J Pharm Exp Ther 304：610-616；2. Shitara Y，Horie T和Sugiyama Y（2006）Eur J Pharm Sci 27：425-446；3. Backman JT，Kyrklund C，Neuvonen M和Neuvonen PJ（2002）Clin Pharmacol Ther 72：685-691。4.Hodel C（2002）Toxicol Lett 128：159-168。5. Williams D和Feely J（2002）Clin Pharmacokinet 41：343-370。6.Campbell SD，de Morais SM和Xu JJ（2004）Chem Biol Interact 150：179-187。7.Hirano M，Maeda K，Shitara Y和Sugiyama Y（2006）Drug Metab Dispos 34：1229-1236。
